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聊一聊ELISA實驗中酶標(biāo)板可靠性的驗證原理
發(fā)布時間： 2017-02-08 點擊次數(shù)： 1278次雖說ELISA實驗的原理及操作簡單，ELISA試劑盒但是由于實驗的特殊性，各個方法也都是影響到實驗結(jié)果的因素之一。有操作員反應(yīng)：做了很多次ELISA實驗，每次都能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致，猜可能是酶標(biāo)板的問題，有什么方法可以快速驗證酶標(biāo)板的可靠性嗎？
我司和大家聊一聊ELISA酶標(biāo)板可靠性的驗證原理：
ELISA本身靈敏性很高，每次做出來的值不一樣很正常，特別是od值比較大的時候更是差別很大，但是只要不要偏差太大就好，一般偏差要求10%內(nèi)吧，好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi)。
首先要ELISA試劑盒穩(wěn)定所有的條件，不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子，如果測定不一樣，就是包被問題或者保護(hù)劑的問題，但這兩個都是各個試劑盒的機密，看看文獻(xiàn)里別人怎么做的。
其次每次實驗的標(biāo)曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的，這與抗原抗體反應(yīng)體系、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關(guān)。鑒定該ELISA體系是否可靠，zui關(guān)鍵的指標(biāo)是加標(biāo)回收率和稀釋線性，如果你懷疑的話可以做一下。
一般來說，國外廠商的ELISA試劑盒是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中ELISA試劑盒的靈敏度，如果樣品濃度低于該檢測下限，則無法檢測到，這是很正常的現(xiàn)象，并不是非要每個樣品都要測出值才可以。