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                    牛口蹄疫(FMD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

                    發(fā)布時間: 2019/8/23  點擊次數(shù): 1432次
                    提 供 商: 研域(上海)化學試劑有限公司 資料大小:
                    圖片類型: 下載次數(shù): 148
                    資料類型: DOC 瀏覽次數(shù): 1432
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                    牛口蹄疫(FMD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒

                    本試劑盒僅供研究使用。

                    檢測范圍:96T

                    使用目的:本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關液體樣本中口蹄疫(FMD)表達。

                    實驗原理

                    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中牛口蹄疫(FMD)表達。用純化的口蹄疫(FMD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中口蹄疫(FMD)相結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后再與HRP標記的口蹄疫(FMD)抗體結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛口蹄疫(FMD)的存在與否。

                    試劑盒組成

                    牛口蹄疫(FMD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒標本要求 

                    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

                    2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

                    操作步驟

                    編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

                    加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

                    溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
                    配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
                    洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
                    加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
                    溫育:操作同3。
                    洗滌:操作同5。
                    顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
                    終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉)。
                    測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

                    計算和結果判定:

                      試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

                      臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

                      陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為口蹄疫(FMD)陰性

                      陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為口蹄疫(FMD)陽性

                    牛口蹄疫(FMD)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項

                    1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

                    2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

                    3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

                    封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

                    5.底物請避光保存。

                    6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm

                    7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。

                    保存條件及有效期

                    1.試劑盒保存:;2-8℃。

                    2.有效期:6個月

                     

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