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                    小鼠ELISA試劑盒鞘氨醇激酶(SPK)酶聯(lián)免疫分析使用方法

                    發(fā)布時間: 2016/6/2  點擊次數(shù): 759次
                    提 供 商: 研域(上海)化學試劑有限公司 資料大小:
                    圖片類型: 下載次數(shù): 127
                    資料類型: DOC 瀏覽次數(shù): 759
                    相關產(chǎn)品:
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                    使用目的:
                    本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中鞘氨醇激酶(SPK)含量。
                    小鼠ELISA試劑盒鞘氨醇激酶(SPK)酶聯(lián)免疫分析使用方法實驗原理
                    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠鞘氨醇激酶(SPK)水平。用純化的小鼠鞘氨醇激酶(SPK)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入鞘氨醇激酶(SPK),再與  HRP 標記的鞘氨醇激酶(SPK)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的鞘氨醇激酶(SPK)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠鞘氨醇激酶(SPK)濃度。
                    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
                    2.不能檢測含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
                    小鼠ELISA試劑盒鞘氨醇激酶(SPK)酶聯(lián)免疫分析使用方法操作步驟
                    1.  標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
                    2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
                    操作程序總結:
                    計算以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與  OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
                    小鼠ELISA試劑盒鞘氨醇激酶(SPK)酶聯(lián)免疫分析使用方法注意事項
                    1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

                    2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
                    3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
                    4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本  OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
                    5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                    6.底物請避光保存。
                    7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
                    8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
                    9.本試劑不同批號組分不得混用。
                    10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
                    保存條件及有效期
                    1.試劑盒保存:;2-8℃。
                    2.有效期:6個月

                     

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